産(chǎn)品信息：

本試劑盒有(yǒu)效期為(wèi)一年

産(chǎn)品簡介: 

Bradford 蛋白濃度測定法是目前常用(yòng)的靈敏度較高的蛋白濃度測定方法之一，其實驗原理(lǐ)是根據考馬斯亮藍(Coommassie Brilliant Blue)G-250與蛋白質(zhì)的堿性和芳香族氨基酸特别是精(jīng)氨酸（Arginine） 在酸性介質(zhì)中(zhōng)結合後，溶液轉變為(wèi)藍色，使染料的最大吸收峰從 465nm 遷移到 595nm，且測定的吸光 值與蛋白濃度成正相關關系；即可(kě)通過測定蛋白在 595nm 處的吸光度，推算蛋白濃度，進而進行定量測定。 

本法通過吸光值，推算蛋白濃度，實現了蛋白濃度測定的快速性和簡便性。靈敏度高，比 Lowry 法大約高四倍，測定速度快、簡單，僅需一種試劑即可(kě)，且不受大多(duō)數樣品中(zhōng)化學(xué)試劑的影響。

注意事項： 

1. Bradford 染色液使用(yòng)前，需将其恢複至室溫，有(yǒu)利于提高檢測的靈敏度；并在使用(yòng)前充分(fēn)混勻

2. 标準曲線(xiàn)也有(yǒu)輕微的非線(xiàn)性，因而不能(néng)用(yòng) Beer 定律進行計算，而隻能(néng)用(yòng)标準曲線(xiàn)來測定未知蛋白質(zhì)的濃度；為(wèi)了得到更精(jīng)确的結果，每個蛋白梯度和樣品均需做複孔，每次試驗都必須建立标準曲線(xiàn) 

3. Bradford 法測定蛋白濃度對大多(duō)數化學(xué)物(wù)質(zhì)的兼容性比較好，比如對還原劑 DTT 的兼容性高達 5mM；但會受到略高濃度的去垢劑影響，需确保 SDS 低于 0.01%，Triton X-100 低于 0.05%，Tween  20/ 60/80 低于 0.015%等 

4. 為(wèi)了您的安(ān)全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作(zuò)

使用(yòng)說明： 

一．配制 BSA 标準品體(tǐ)系（線(xiàn)性範圍 100-1500ug/ml）： 

可(kě)參考下表配制不同濃度的标準品梯度 ，并充分(fēn)混勻，避免氣泡生成：

标準品稀釋液原則上應與為(wèi)蛋白樣品的溶解液一緻，但也可(kě)用(yòng)蒸餾水、生理(lǐ)鹽水或 PBS 進行稀釋

二. 蛋白濃度測定： 

（1）分(fēn)别取 5µl 不同濃度蛋白标準品和待測樣品加入 96 孔闆中(zhōng)；若樣品不足，可(kě)以用(yòng)稀釋液進行稀釋，但須記錄樣品稀釋比例 

（2）各孔加入 200µl G250 染色液，充分(fēn)振蕩混勻，室溫孵育 2-3min 

（3）用(yòng)酶标儀測定 595nm 處的吸光度

（4）以标準蛋白濃度（ug/ml）為(wèi)橫坐(zuò)标，用(yòng) OD 值為(wèi)縱坐(zuò)标繪制标準曲線(xiàn)，根據測出的待測樣品的 A595 值，即可(kě)得出樣品的蛋白質(zhì)濃度，進而進行定量計算

參考标準曲線(xiàn)：